CHE -Bi

Cholinesterase bi
Butyrylthiocholine. Kinetic

Quantitative determination of cholinesterase (CHE) 5. Read initial absorbance (A) of the sample, start the stopwatch and
IVD read the absorbance at 30 seconds intervals thereafter for 1.5 minutes.
6. Calculate the difference between absorbances and the average
Store at 2-8ºC absorbance differences per 30 seconds (A/30 s).

PRINCIPLE OF THE METHOD CALCULATIONS

Cholinesterase hydrolysed butyrylthiocholine to butyrate and 25º- 30ºC A / 30 s x 23460 = U/L
thiocholine. Thiocholine reacts with 5,5’-dithiobis-2-nitrobenzoic acid
(DTNB) to form nitro-2-mercapto-5-benzoato according the following 37ºC A / 30 s x 46920 = U/L
reactions: Calculating factor in automatic analyzers (A/min.) is 23460 at 37ºC.
Cholineste rase
Butyrylthiocholine + H2O  Butyrate + Thiocholine Units: One international unit (IU) is the amount of enzyme that transforms 1 mol of
substrate per minute, in standard conditions. The concentration is expressed in units
Thiocholine + DTNB  nitro-2-mercapto-5-benzoato per litre of sample (U/L).
The rate of nitro-2-mercapto-5-benzoato formation, measured Temperature conversion factors
photometrically, is proportional to the enzymatic activity of To correct results to other temperatures multiply by:
cholinesterase in the sample1,2.
Assay Conversion factor to
CLINICAL SIGNIFICANCE temperature 25ºC 30ºC 37ºC
Cholinesterase is an enzyme present in plasma and synthesized by 25ºC 1.00 1.24 1.55
the liver. Its true physiological function is unknown, so its function may 30ºC 0.81 1.00 1.26
be to hydrolyze choline in plasma. Cholinesterase activity is usually 37ºC 0.64 0.80 1.00
measured for liver function, is a sensitive test of exposure to
pesticides organophosphorus and identification of patients with the QUALITY CONTROL
atypical form of enzyme whose presents high sensitivity to succinyl- Control sera are recommended to monitor the performance of assay
choline1,5,6. procedures: SPINTROL H Normal and Pathologic (Ref. 1002120 and
Clinical diagnosis should not be made on a single test result; it should 1002210).
integrate clinical and other laboratory data. If control values are found outside the defined range, check the instrument,
reagents and technique for problems.
REAGENTS Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and
R1 Phophate pH 7.7 50 mmol/L corrective actions if controls do not meet the acceptable tolerances.
Buffer 5,5 DTNB 0.25 mmol/L
REFERENCE VALUES1
R2
Butyrylthiocholine 7 mmol/L 25ºC 30ºC 37ºC
Substrate
3000 – 9300 U/L 3714 – 11513 U/L 4659 – 14443 U/L
PREPARATION These values are for orientation purpose; each laboratory should establish its
- Working reagent (WR1): own reference range.
Dissolve (  ) the contents of each vial of R 1 in 50 mL of distilled water.
PERFORMANCE CHARACTERISTICS
- Working reagent (WR2):
Measuring range: From detection limit of 6 U/L to linearity limit of 9000 U/L.
Dissolve (  ) the contents of each vial of R 2 in 3 mL of distilled water. If the results obtained were greater than linearity limit, dilute the sample 1/5 with
Cap vial and mix gently to dissolve contents. NaCl 9 g/L and multiply the result by 5.
Stability: 8 weeks at 2-8ºC. Avoid direct sunlight. Precision:

STORAGE AND STABILITY Intra-assay (n=20) Inter-assay (n=20)

All the components of the kit are stable until the expiration date on the Mean (U/L) 6571 3309 6557 3342
label when stored tightly closed at 2-8ºC, protected from light and SD 45.7 24.6 53.4 43.5
contaminations prevented during their use. CV (%) 0.70 0.74 0.81 1.30
Do not use reagents over the expiration date. Sensitivity: 1 U/L = 0.00006 A / 30 s.
Signs of reagent deterioration: Accuracy: Results obtained using SPINREACT reagents (y) did not show
- Presence of particles and turbidity. systematic differences when compared with other commercial reagents (x).
- Blank absorbance (A) at 405 nm  1.20. The results of the performance characteristics depend on the analyzer used.

ADDITIONAL EQUIPMENT INTERFERENCES

- Spectrophotometer or colorimeter measuring at 405 nm. Moderate hemolysis will not interfere in the results.1,2. A list of drugs and
- Thermostatic bath at 25ºC, 30ºC o 37ºC ( 0.1ºC) other interfering substances with cholinesterase determination has been
- Matched cuvettes 1.0 cm light path. reported by Young et. al3,4.
- General laboratory equipment.
NOTES
SAMPLES SPINREACT has instruction sheets for several automatic analyzers.
Serum or heparinized or EDTA plasma1: Stability 7 days at 2-8ºC. Instructions for many of them are available on request.
PROCEDURE BIBLIOGRAPHY
1. Assay conditions: 1. King M. Cholinesterase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
Wavelength: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 405 nm Toronto. Princeton 1984; 1108-1111.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . 1 cm light path 2. Whittaker M. et al. Comparasion of a Commercially Available Assay System with
Constant temperature . . . . . . . . . . . . . . .25ºC /30ºC / 37ºC Two Reference Methods for the Determination of Plasma Cholinesterase
Variants..Clin. Chem 1983;(29/10); 1746-1760.
2. Adjust the instrument to zero with distilled water or air.
3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
3. Pipette into a cuvette: 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
25 - 30ºC 37ºC 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
WR1 (mL) 1.5 1.5
WR2 (L) 50 50 PACKAGING
Sample (L) 10 -- R1: 4 → 50 mL
Ref: 1001102 Cont.
Sample diluted 1/2 with NaCl 9 g/L (L) -- 10 R2: 4 → 3 mL

4. Mix and wait 30 seconds.

BEIS22-I 21/01/14 SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: [email protected]
 CHE -Bi

Colinesterasa bi
Butiriltiocolina. Cinética

Determinación cuantitativa de colinesterasa (CHE) 5. Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el
IVD cronometro y leer la absorbancia cada 30 segundos durante 1,5 min.
6. Calcular el promedio de la diferencia de absorbancia por intervalo de 30
Conservar a 2-8ºC segundos (A/30 s).
PRINCIPIO DEL METODO CALCULOS
La colinesterasa hidroliza la butiriltiocolina a tiocolina y butirato. 25º- 30ºC A / 30 s x 23460 = U/L
La tiocolina reacciona con el ácido 5.5’-ditiobis-2-nitrato (DTNB) y
formado 2-nitromercaptobenzoato, según el siguiente esquema de 37ºC A / 30 s x 46920 = U/L
reacción: El factor de cálculo en analizadores automáticos (A/min) es 23460 a 37ºC.
Colinester asa
Butiriltiocolina + H2O  Tiocolina + Butirato Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 mol
de substrato por minuto. La concentración se expresa en unidades por litro (U/L).
Tiocolina + DTNB  2-nitromercaptobenzoato
La velocidad de formación de 2-nitromercaptobenzoato, determinado Factores de conversión de temperaturas:
fotometricamente, es proporcional a la actividad enzimática de Los resultados pueden transformarse a otras temperaturas multiplicando por:
colinesterasa en la muestra ensayada1,2. Temperatura Factor para convertir a
de medición 25ºC 30ºC 37ºC
SIGNIFICADO CLINICO
La colinesterasa es una enzima presente en el plasma y sintetizada 25ºC 1,00 1,24 1,55
en el hígado. Su función fisiológica no se conoce claramente, aunque 30ºC 0,81 1,00 1,26
se le atribuye un papel importante como regulador de la 37ºC 0,64 0,80 1,00
concentración de la colina en el plasma. CONTROL DE CALIDAD
La determinación de su actividad nos ayuda a evaluar la función Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
hepática, detectar la exposición excesiva a pesticidas SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).
organofosforados e identificar pacientes con formas atípicas de la Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe
enzima que presentan una sensibilidad aumentada al anestésico revisar el instrumento, los reactivos y la técnica.
succinilcolina1,5,6. Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
datos clínicos y de laboratorio.
VALORES DE REFERENCIA2
REACTIVOS 25ºC 30ºC 37ºC
R1 Fosfato pH 7,7 50 mmol/L 3000 – 9300 U/L 3714 – 11513 U/L 4659 – 14443 U/L
Tampón 5,5 DTNB 0,25 mmol/L Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
R2 establezca sus propios valores de referencia.
Butiriltiocolina 7 mmol/L
Substrato
CARACTERISTICAS DEL METODO
PREPARACION Rango de medida: Desde el limite de detección 6 U/L hasta el limite de
- Reactivo de trabajo (RT1): linealidad 9000 U/L.
Disolver (  ) el contenido del vial R1 en 50 mL de agua destilada. Si la concentración de la muestra es superior al limite de linealidad, diluir
- Reactivo de trabajo (RT2): 1/5 con ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 5.
Disolver (  ) el contenido del vial R2 en 3 mL de agua destilada. Precisión:
Tapar el vial y mezclar suavemente hasta disolver su contenido. Intraserie (n= 20) Interserie (n= 20)
Estabilidad: 8 semanas a 2-8ºC, protegidos de la luz. Media (U/L) 6571 3309 6557 3342
SD 45,7 24,6 53,4 43,5
CONSERVACION Y ESTABILIDAD CV (%) 0,70 0,74 0,81 1,30
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad
indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen los viales bien Sensibilidad analítica: 1 U/L = 0,00006 A / 30 s.
cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación. Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos
Indicadores de deterioro de los reactivos: comerciales (x).
- Presencia de partículas y turbidez. Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.
- Absorbancias (A) del Blanco a 405 > 1,20.
INTERFERENCIAS
MATERIAL ADICIONAL Hemólisis moderada no interfiere en los resultados 1,2. Se han descrito
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 405 nm.
varias drogas y otras substancias que interfieren en la determinación de la
- Baño termostatable a 25ºC, 30ºC ó 37ºC ( 0,1ºC)
colinesterasa3,4.
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
- Equipamiento habitual de laboratorio. NOTAS
MUESTRAS SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicación de
Suero o plasma heparinizado o con EDTA 1. Estabilidad: 7 días a 2-8ºC. este reactivo en distintos analizadores.

PROCEDIMIENTO BIBLIOGRAFIA
1. Condiciones del ensayo: 1. King M. Cholinesterase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
Toronto. Princeton 1984; 1108-1111.
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 405 nm 2. Whittaker M. et al. Comparasion of a Commercially Available Assay System with
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . 1 cm paso de luz Two Reference Methods for the Determination of Plasma Cholinesterase
Temperatura constante . . . . . . . . . . . . . . . 25ºC / 30ºC / 37ºC Variants..Clin. Chem 1983;(29/10); 1746-1760.
2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada o aire. 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
3. Pipetear en una cubeta: 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
25 - 30ºC 37ºC 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
RT1 (mL) 1,5 1,5
50 50 PRESENTACION
RT2 (L)
R1: 4 → 50 mL
Muestra (L) 10 -- Ref: 1001102 Cont.
R2: 4 → 3 mL
Muestra diluida 1/2 con ClNa 9 g/L (L) -- 10
4. Mezclar y esperar 30 segundos.

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Colinesterasa bi
Butyrylthiocholine. Cinétique
Détermination quantitative de cholinestérase (CHE) 4. Mélanger et attendre 30 secondes.
IVD 5. Lire l'absorbance (A) initiale de l'échantillon, mettre le chronomètre en
marche et lire l'absorbance toutes les 30 secondes pendant 1,5 minutes.
Conserver à 2 - 8 ºC 6. Calculer la moyenne de la différence d'absorbance par intervalle de 30
PRINCIPE DE LA MÉTHODE secondes (A/30 s).
La cholinestérase hydrolyse la butyrylthiocholine en thiocholine et
butyrate. CALCULS
La thiocholine réagit avec l'acide 5,5′-dithiobis 2-nitrobenzoïque, 25 ºC- 30 ºC A / 30 s x 23460 = U/L
(DTNB) et forme le 2-nitro-mercapto-benzoate, selon le schéma de
réaction suivant : 37 ºC A / 30 s x 46920 = U/L
Colinesterasa Le facteur de calcul dans des analyseurs automatiques (A/min) est de
Butyrylthiocholine + H2O  Thiocholine + Butyrate
23460 à 37 ºC.
Thiocholine + DTNB  2-nitro-mercapto-benzoate Unités : L'unité internationale (UI) est la quantité d'enzyme qui convertit 1
La vitesse de formation de 2-nitro-mercapto-benzoate, déterminée par mol de substrat par minuteLa concentration est exprimée en unités par
photométrie, est proportionnelle à l'activité enzymatique de la litre (U/L).
cholinestérase dans l'échantillon testé1,2. Facteurs de conversion de températures :
Les résultats peuvent être transformés dans d'autres températures en
SIGNIFICATION CLINIQUE multipliant par :
La cholinestérase est une enzyme présente dans le plasma et Température Facteur de conversion à
synthétisée dans le foie. Sa fonction physiologique n'est pas de mesure 25 ºC 30 ºC 37 ºC
clairement connue, bien qu'un rôle important lui est attribué comme
25 ºC 1,00 1,24 1,55
régulatrice de la concentration de choline dans le plasma.
30 ºC 0,81 1,00 1,26
La détermination de son activité nous aide à évaluer la fonction
37 ºC 0,64 0,80 1,00
hépatique, à détecter une exposition excessive à des pesticides
CONTRÔLE DE QUALITÉ
organophosphorés et à identifier des patients ayant des formes
Il convient d'analyser avec les échantillons des sérums de contrôle
atypiques de l'enzyme, présentant une sensibilité accrue à la
évalués :
succinylcholine, qui est un produit anesthésiant1,5,6.
SPINTROL H Normal et Pathologique (Réf. 1002120 et 1002210).
Le diagnostic clinique doit être réalisé en tenant compte de toutes les
Si les valeurs obtenues sont en-dehors de la plage de tolérance,
données cliniques et de laboratoire.
l'instrument, les réactifs et la technique devront être vérifiés.
RÉACTIFS Chaque laboratoire doit disposer de son propre Contrôle de Qualité et
R1 Phosphate pH 7,7 50 mmol/L établir des corrections en cas de non conformité en termes de tolérances
Tampon 5,5 DTNB 0,25 mmol/L des contrôles.
R2
Butyrylthiocholine 7 mmol/L VALEURS DE RÉFÉRENCE2
Substrat
25 ºC 30 ºC 37 ºC
PRÉPARATION 3000 – 9300 U/L 3714 – 11513 U/L 4659 – 14443 U/L
- Réactif de travail (RT1) :
Ces valeurs sont données à titre d'information. Chaque laboratoire devrait
Dissoudre (  ) le contenu du flacon R1 dans 50 mL d'eau
établir ses propres valeurs de référence.
distillée.
- Réactif de travail (RT2) : CARACTÉRISTIQUES DE LA MÉTHODE
Dissoudre (  ) le contenu du flacon R2 dans 3 mL d'eau distillée. Plage de mesure : Depuis la limite de détection de 6 U/L jusqu'à la limite de
Boucher le flacon et mélanger doucement jusqu'à en dissoudre le linéarité de 9000 U/L.
contenu. Si la concentration de l'échantillon est supérieure à la limite de linéarité,
Stabilité : 8 semaines à 2-8 ºC, protégés de la lumière. diluer 1/5 avec du NaCl 9 g/L et multiplier le résultat final par 5.
CONSERVATION ET STABILITÉ Précision :
Tous les composants du kit sont stables jusqu'à la date d'expiration Intra-série (n= 20) Inter-série (n= 20)
indiquée sur l'étiquette du flacon, lorsque les flacons sont maintenus bien Moyenne (U/L) 6571 3309 6557 3342
fermés à 2-8 ºC, protégés de la lumière et en évitant leur contamination. Écart-type 45,7 24,6 53,4 43,5
Ne pas utiliser les réactifs en-dehors de la date indiquée. CV (%) 0,70 0,74 0,81 1,30
Indicateurs de détérioration des réactifs : Sensibilité analytique : 1 U/L = 0,00006 A / 30 s.
- Présence de particules et turbidité. Exactitude : Les réactifs SPINREACT (y) n'ont pas montré de différences
- Absorbance (A) du Blanc à 405 > 1,20. systématiques significatives par rapport aux autres réactifs commerciaux
MATÉRIEL SUPPLÉMENTAIRE (x).
- Spectrophotomètre ou analyseur pour lectures à 405 nm. Les caractéristiques de la méthode peuvent varier selon l'analyseur utilisé.
- Bain thermostatable à 25 ºC, 30 ºC ou 37 ºC (0,1 ºC)
- Cuvettes de 1,0 cm de passage de lumière INTERFERENCES
- Équipement habituel de laboratoire. L'hémolyse modérée n’interfère pas dans les résultats1,2. Plusieurs drogues
et autres substances ont été décrites comme interférant dans la
ÉCHANTILLONS
Sérum ou plasma hépariné ou avec EDTA1. Stabilité : 7 jours à 2-8 °C détermination de la cholinestérase3,4.

PROCÉDURE REMARQUES
1. Conditions d'essai : SPINREACT dispose d'instructions détaillées pour l'application de ce
Longueur d'onde : . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 405 nm réactif dans différents analyseurs.
Cuvette : . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ... 1 cm passage de lumière
BIBLIOGRAPHIE
Température constante. . . . . . . . . . . . . . . 25 ºC / 30 ºC / 37 ºC 1. King M. Cholinesterase.Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto.
2. Ajuster le spectrophotomètre à zéro par rapport à l'eau distillée ou Princeton 1984; 1108-1111.
à l'air. 2. Whittaker M. et al. Comparasion of a Commercially Available Assay System with Two
Reference Methods for the Determination of Plasma Cholinesterase Variants..Clin. Chem
3. Pipeter dans une cuvette : 1983;(29/10); 1746-1760.
25 - 30 ºC 37 ºC 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
RT1 (mL) 1,5 1,5 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th edAACC 2001.
5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
RT2 (L) 50 50 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd edAACC 1995.
Échantillon (L 10 --
PRÉSENTATION
Échantillon dilué 1/2 avec NaCl 9 g/L (L -- 10
R1 : 4 → 50 mL
Réf : 1001102 Cont.
. R2 : 4 → 3 mL

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Colinesterase bi
Butiriltiocolina. Cinética

Determinação quantitativa de colinesterase (CHE) 6. Calcular a média da diferença de absorvância por intervalo de 30 segundos
IVD (A/30 s).

Conservar a 2 – 8 ºC CÁLCULOS
25 º- 30 ºC A / 30 s x 23460 = U/L
PRINCÍPIO DO MÉTODO
A colinesterase hidrolisa a butiriltiocolina em tiocolina e butirato. 37 ºC A / 30 s x 46920 = U/L
A tiocolina reage com o ácido 5.5’-ditiobis-2-nitrato (DTNB) e forma 2-
O fator de cálculo em analisadores automáticos (A/min) é 23460 a 37 ºC.
nitromercaptobenzoato, de acordo com o esquema de reação seguinte:
Butiriltiocolina + H2O Colinester
 ase
 Tiocolina + Butirato Unidades: A unidade internacional (UI) é a quantidade de enzima que converte
1 mol de substrato por minuto. A concentração é expressa em unidades por
Tiocolina + DTNB  2-nitromercaptobenzoato litro (U/L).
A velocidade de formação de 2-nitromercaptobenzoato, determinado
fotometricamente, é proporcional à atividade enzimática da colinesterase Fatores de conversão de temperaturas:
na amostra testada1,2. Os resultados podem transformar-se para outras temperaturas multiplicando por:

SIGNIFICADO CLÍNICO Temperatura Fator para converter para

A colinesterase é uma enzima presente no plasma e sintetizada no fígado. de medição 25 ºC 30 ºC 37 ºC
A sua função fisiológica não é claramente conhecida, embora se lhe 25 ºC 1,00 1,24 1,55
atribua um papel importante como regulador da concentração de colina no 30 ºC 0,81 1,00 1,26
plasma. 37 ºC 0,64 0,80 1,00
A determinação da sua atividade ajuda a avaliar a função hepática,
detetar a exposição excessiva a pesticidas organofosforados e identificar CONTROLO DE QUALIDADE
doentes com formas atípicas da enzima que apresentam uma É conveniente analisar juntamente com as amostras de soros controlo avaliados:
sensibilidade aumentada ao anestésico succinilcolina1,5,6. SPINTROL H Normal e Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).
O diagnóstico clínico deve ser realizado tendo em consideração todos os Se os valores detectados se encontrarem fora do intervalo de tolerância, deve-
dados clínicos e laboratoriais. se rever o instrumento, os reagentes e o calibrador.
Cada laboratório deve dispor do seu próprio Controlo de Qualidade e
REAGENTES estabelecer ações corretivas no caso de os controlos não estarem de acordo
R1 Fosfato pH 7,7 50 mmol/L com as tolerâncias aceitáveis.
Tampão 5,5 DTNB 0,25 mmol/L
R2 VALORES DE REFERÊNCIA2
Butiriltiocolina 7 mmol/L 25 ºC 30 ºC 37 ºC
Substrato
3000 – 9300 U/L 3714 – 11513 U/L 4659 – 14443 U/L
PREPARAÇÃO Estes valores são indicativos. É recomendável que cada laboratório estabeleça
- Reagente de trabalho (RT1): os seus próprios valores de referência.
Dissolver (  ) no conteúdo do frasco R1 em 50 mL de água destilada.
- Reagente de trabalho (RT2): CARACTERÍSTICAS DO MÉTODO
Dissolver (  ) no conteúdo do frasco R2 em 3 mL de água destilada. Intervalo de medição: Desde o limite de deteção 6 U/L até ao limite de
Tapar o frasco e misturar suavemente até dissolver o seu conteúdo. linearidade 9000 U/L.
Estabilidade: 8 semanas a 2 - 8 ºC, protegidos da luz. Se a concentração da amostra for superior ao limite de linearidade, diluir 1/5
com NaCl 9 g/L e multiplicar o resultado final por 5.
CONSERVAÇÃO E ESTABILIDADE Precisão:
Todos os componentes do kit são estáveis até à data de validade indicada Intra-série (n= 20) Inter-série (n= 20)
no rótulo do frasco quando os frascos são mantidos bem fechados a 2 - 8 Média (U/L) 6571 3309 6557 3342
ºC e se evita a contaminação durante a sua utilização. Não utilizar SD 45,7 24,6 53,4 43,5
reagentes que tenham excedido a data de validade indicada. CV (%) 0,70 0,74 0,81 1,30
Indicadores de degradação dos reagentes: Sensibilidade analítica: 1 U/L = 0,00006 A / 30 s.
- Presença de partículas e turvação Exatidão: os reagentes SPINREACT (y) não apresentam diferenças
- Absorvâncias (A) do branco a 405 > 1,20. sistemáticas significativas quando comparados com outros reagentes comerciais
(x).
MATERIAL ADICIONAL As características do método podem variar em função do analisador utilizado.
- Espetrofotómetro ou analisador para leituras a 405 nm.
- Banho termostático a 25 ºC, 30 ºC ou 37 ºC ( 0,1 ºC) INTERFERÊNCIAS
- Cuvetes de 1,0 cm caminho de luz. A presença de hemólise moderada não interfere com os resultados1,2. Foram
- Equipamento habitual de laboratório. descritos vários fármacos e outras substâncias que interferem na determinação
da colinesterase3,4.
AMOSTRAS
Soro ou plasma heparinizado ou com EDTA 1. Estabilidade: 7 dias a 2 – 8 NOTAS
ºC. A SPINREACT dispõe de instruções detalhadas para a aplicação deste
reagente em diferentes analisadores.
PROCEDIMENTO
1. Condições do teste: BIBLIOGRAFIA
Comprimento de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 405 nm 1. King M. Cholinesterase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St
Cuvete:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . 1 cm caminho de luz Louis. Toronto. Princeton 1984; 1108-1111.
Temperatura constante . . . . . . . . . . . . . . . . .25 ºC / 30 ºC / 37 ºC 2. Whittaker M. et al. Comparasion of a Commercially Available Assay System
2. Ajustar o espetrofotómetro a zero com água destilada ou ar. with Two Reference Methods for the Determination of Plasma
3. Pipetar numa cuvete: Cholinesterase Variants..Clin. Chem 1983;(29/10); 1746-1760.
25 – 30 ºC 37 ºC 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press,
RT1 (mL) 1,5 1,5 1995.
RT2 (L) 50 50 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Amostra (L) 10 --
6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Amostra diluída 1/2 com NaCl 9 g/L(L) -- 10
4. Misturar e esperar 30 segundos. APRESENTAÇÃO
5. Ler a absorvância (A) inicial da amostra, colocar o cronómetro em R1: 4 → 50 mL
funcionamento e ler a absorvância a cada 30 segundos durante 1,5 Ref: 1001102 Cont.
R2: 4 → 3 mL
min.

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