LABORATORIO CLÍNICO

Rev Med Chile 2011; 139: 542-547

Conceptos básicos sobre el estudio

de paternidad

Marcela Lagos L.1, Helena Poggi M.1,a,

Cecilia Mellado S.2

1
Departamento de
Basic concepts about paternity testing
Laboratorios Clínicos.
2
Departamento de Nowadays, the analysis of genetic markers is a very important and validated
Pediatría. tool for the identification of individuals, and for paternity testing. To do so, highly
Facultad de Medicina,
variable regions of the human genome are analyzed, making it possible to obtain the
Pontificia Universidad
Católica de Chile.
genetic profile of an individual, and to distinguish between different individuals. The
Santiago de Chile. methodology used is basically the same all over the world, consisting in the analysis
a
Bioquímica. of 13 to 15 markers. To assign biological paternity the child must have inherited the
characteristics from the alleged father in each of the genetic markers analyzed. This
Recibido el 24 de marzo de
analysis achieves a certainty higher than with any other test, which is expressed as
2011, aceptado el 30 de
marzo de 2011.
the probability of paternity. This probability has to be at least 99.9%, but greater
probabilities are usually obtained, especially if the mother is included in the analysis.
Correspondencia: If the characteristics of two or more genetic markers from the alleged father are absent
Dra. Marcela Lagos L. in the child, biological paternity is excluded.
Laboratorio de Biología
(Rev Med Chile 2011; 139: 542-547).
Molecular. Departamento
de Laboratorios Clínicos
Key words: Forensic genetics; Genetic testing; Paternity.
Facultad de Medicina.
Pontificia Universidad
Católica de Chile.
Vicuña Mackenna 4686,
RESUMEN
Macul. Santiago, Chile.
Tel.: 3548515 - 3548584
Fax: 5523464 - 3548603 El análisis de marcadores genéticos se ha convertido en una herramienta
E-mail: mlagos@med. muy importante y ampliamente reconocida para la identificación de individuos
puc.cl y para el estudio de paternidad. Para esto se estudian distintas regiones del
genoma humano que son altamente variables en la población y que permiten
obtener el perfil genético y distinguir entre distintos individuos. La metodología
que se utiliza es básicamente la misma en todo el mundo y consiste en el análisis
de entre 13 a 15 marcadores. La paternidad biológica se asigna cuando el hijo/a
presenta las características que debe heredar del presunto padre en cada uno de
los marcadores genéticos estudiados. A través de este análisis es posible asignar
paternidad con un grado de certeza más alto que con cualquier otro sistema, el que
se expresa como probabilidad de paternidad. Esta probabilidad debe alcanzar al
menos 99,9%. Sin embargo, es posible obtener probabilidades mucho más altas,
sobre todo si se incluye a la madre en el estudio. Si las características genéticas
del supuesto padre están ausentes en el hijo/a en al menos dos marcadores, se
excluye la paternidad biológica.

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 LABORATORIO CLÍNICO
Conceptos básicos sobre estudio de paternidad - M. Lagos et al

DE LA VIDA REAL

Un hombre de 30 años, soltero, tiene dudas sobre la paternidad de un menor de 3 años y se realiza
estudio de paternidad. En el informe de resultados se indican las fechas de toma de muestra, los datos
personales, los distintos marcadores genéticos estudiados y los alelos presentes en el hijo y en el padre.
En la conclusión del estudio se indica que la probabilidad de paternidad es de 99,89%. El estudio no
incluye a la madre, quien no quiso tomarse muestra de sangre, pero autorizó el estudio del niño, ya que
no está reconocido por el padre. Madre y padre le consultan por la interpretación de estos resultados
y el grado de certeza del examen.
¿Con qué grado de certeza se puede asignar paternidad y cómo se expresa?
¿Es importante incluir a la madre en un estudio de paternidad?

Un problema antiguo con soluciones nuevas duos (99,9%). Sin embargo, hay regiones (0,1%)
que son altamente variables y que nos diferencian
Desde los tiempos del Imperio Romano hay de otros individuos, sobre cuya base es posible
registros sobre disputas por la paternidad, con obtener el perfil genético de un individuo2. A la
fines del pago de alimentos o de herencia, pero variante heredada de uno o el otro progenitor se
también con el sólo fin de que ésta sea reconocida. le denomina alelo materno o paterno.
Sin embargo, existían dificultades importantes La identificación de individuos basada en
para probar la paternidad, ya que “las pruebas” se el estudio de ADN se puede realizar a partir de
basaban principalmente en el parecido físico. La prácticamente cualquier muestra biológica: san-
posibilidad de asignar o excluir paternidad era tan gre, mucosa bucal, pelo, orina, dientes o incluso
incierta que, por ejemplo, en Francia a comienzos de material biológico degradado. Es por eso que
del siglo XIX se prohibieron las demandas por pa- este análisis no sólo es útil para el estudio de pa-
ternidad, basándose en el principio de pater semper ternidad/maternidad y otros parentescos3, sino
incertus1. En la primera mitad del siglo XX hubo que también se utiliza en estudios forenses, en
avances importantes, dado que fue posible contar investigaciones históricas y estudios antropoló-
con herramientas objetivas como la determinación gicos, así como también se aplica en otras áreas
de los grupos sanguíneos que permitían excluir pa- de la medicina como el análisis de quimerismo
ternidad claramente, pero asignar paternidad con post-trasplante de médula ósea4.
altos niveles de certeza aun seguía siendo un desa-
fío. Recién en los últimos 20 años se produjeron
los avances tecnológicos que han tenido el mayor ¿Qué regiones del genoma se estudian y cómo?
impacto en el estudio de paternidad gracias a la
identificación de individuos basada en el análisis Las regiones variables o polimórficas que se
de determinadas regiones del ADN. utilizan actualmente para identificación humana
son secuencias cortas repetidas en tándem o STR
(Short Tandem Repeats). Las secuencias utilizadas
El perfil genético se componen de unidades que contienen cada una
4 a 5 pares de bases nucleotídicas (por ejemplo,
Como organismos diploides que somos, todos ACAG) y lo que varía es el número de veces que
los seres humanos poseemos dos sets de informa- estas unidades se repiten en cada individuo5. En el
ción genética, uno heredado del padre y otro de la ejemplo de la Figura 1, el hijo hereda de la madre
madre, por lo tanto, la información genética del un alelo con 15 repeticiones, lo que implica que
padre biológico debe estar presente en el hijo. Esta del padre recibió el alelo con 18 repeticiones; a
información está contenida en los cromosomas y este alelo que necesariamente se hereda del padre
su ADN, y tiene una alta homología entre indivi- dado que se conoce el alelo de la madre, se le llama

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Conceptos básicos sobre estudio de paternidad - M. Lagos et al

incidir por azar con uno de los alelos del supuesto

padre, por lo que es necesario estudiar varios STR
conjuntamente.
14 / 18 15 / 17 La metodología que se utiliza es básicamente la
misma en todo el mundo y consiste en el análisis
de entre 13 a 15 STR distribuidos en su mayoría
en distintos cromosomas, así como un STR adicio-
nal para identificar el sexo6 (Tabla 1). Todas estas
regiones se analizan simultáneamente, utilizando
15 / 18
una metodología llamada reacción en cadena de
la polimerasa o PCR (Polymerase Chain Reaction),
con la que se obtienen millones de copias de cada
Figura 1. Ejemplo de un caso de paternidad (padre-madre- región. Esto permite el análisis de cantidades
hijo) con una distribución de los alelos en un STR que no muy pequeñas de ADN, lo que es especialmente
permite excluir paternidad. importante en las investigaciones forenses. Los
productos de la PCR, que varían en el tamaño de
acuerdo al número de repeticiones que cada indi-
viduo tenga, se separan por electroforesis capilar
alelo paterno obligado. Aunque estas regiones son y se detectan por fluorescencia. Finalmente, se
polimórficas, el número de repeticiones de un obtiene el número de repeticiones que presentan
determinado STR no es único de un individuo, es el presunto padre, la madre y el hijo/a para cada
decir, el alelo paterno obligado del hijo/a puede co- uno de los STR estudiados.

Tabla 1. STR habitualmente utilizados para el estudio de paternidada

Nombre de la región Cromosoma Rango de n de repeticiones n de alelos observados

TPOX 2 6-13 10
D2S1338* 2 11-28 22
D3S1358 3 9-20 20
FGA 4 15-51,2 69
CSF1PO 5 6-16 15
D5S818 5 7-16 10
D7S820 7 6-15 22
D8S1179 8 8-19 13
TH01 11 3-14 20
VWA 12 10-24 28
D13S317 13 5-15 14
Penta E** 15 5-26 39
D16S539 16 5-15 10
D18S51 18 7-27 43
D19S433* 19 5,2-20 30
D21S11 21 24-38 70
Penta D** 21 1,1-18 39
a
Los STR reciben el nombre de acuerdo a su ubicación. Por ejemplo: VWA por el factor von Willebrand o D3S1358 ya que
corresponde a una determinada región en el cromosoma 3. *incluidos en ensayo comercial AmpFlSTR®IdentifilerTM (Applied
Biosystems). **incluidos en ensayo comercial Powerplex®16 (Promega).

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Conceptos básicos sobre estudio de paternidad - M. Lagos et al

¿Con qué certeza se excluye o asigna es posible que el padre presente un alelo que no
paternidad? se observe en el hijo, aun siendo el padre bioló-
gico. Estas mutaciones son poco frecuentes y los
Una vez que se han comparado los perfiles del laboratorios que realizan este examen tienen como
hijo/a con los del supuesto padre y hay dos o más norma confirmar los resultados con un segundo
STR en que no se observan alelos que tengan el análisis cuando esto sucede.
mismo número de repeticiones, se excluye la pa- En el ejemplo de la Tabla 3, el hijo/a presenta
ternidad y no se requiere realizar ningún cálculo en todos los STR un alelo heredado de la madre
probabilístico. En Chile, al igual que en otros y el otro del presunto padre, por lo que se asigna
países, se exige que la exclusión de paternidad se paternidad. La certeza, sin embargo, no es de
demuestre en al menos dos marcadores7, aunque 100%, dado que teóricamente no se puede excluir
por lo general, es posible excluir la paternidad en la posibilidad que otro sujeto en la población posea
base a más marcadores. En el ejemplo de la Tabla el mismo perfil genético para los STR estudiados.
2, que no incluye a la madre, hay 6 STR en que el Para estimar el grado de certeza con que se asig-
hijo/a no presenta alelos del supuesto padre, lo na la paternidad es necesario contrastar la probabi-
que excluye la paternidad. En los otros STR, los lidad que los alelos presentes en el hijo provengan
supuestos padre e hijo/a comparten alelos con el del presunto padre versus la probabilidad que los
mismo número de repeticiones por azar. haya recibido de cualquier otro individuo en la
El hecho que no se excluya paternidad en base población. De acuerdo a eso, se calcula la razón
a sólo un marcador, se debe a que existe la posi- entre ambas probabilidades, denominada índice
bilidad de que, de una generación a otra, ocurran de paternidad (IP), que expresa cuantas veces es
cambios o mutaciones en el ADN que afecten los más probable que el presunto padre sea el padre
resultados en ese marcador. Como consecuencia, biológico a que lo sea cualquier otro sujeto en la
población. El IP se modificará principalmente en
Tabla 2. Perfiles genéticos de un supuesto padre función de la frecuencia con que se observen los
y su hijo/a en un caso de exclusión de paternidad alelos heredados del padre en la población general;
utilizando 15 STR a menor frecuencia alélica, mayor el IP y mayor la
probabilidad de que sea el padre biológico. En el
Marcadores Alelos del Alelos del ejemplo de la Tabla 3, el IP en el STR D8S1179 es
padre hijo de 4,26, es decir, es 4,26 veces más probable que
D3S1358 14 15 15 15 el supuesto padre sea el padre biológico respecto
a que lo sea otro sujeto de la población elegido al
vWA 16 16 16 18
azar. En cambio, para el STR TPOX el IP alcanza
FGA 23 27 21 22 sólo 1,06 ya que en este caso el alelo heredado del
D8S1179 10 13 10 11 padre es más frecuente en la población.
D21S11 32,2 33,2 29 31 Dado que los STR incluidos en un estudio de
paternidad se heredan en forma independiente,
D18S51 15 21 17 18
es posible calcular la probabilidad para todos los
D5S818 9 10 10 11 STR en conjunto, multiplicando los IP obtenidos
D13S317 8 14 10 11 para cada STR (IP combinado). A partir del IP
D7S820 10 10 10 11
combinado, se calcula la probabilidad de paterni-
dad (PP) según la fórmula: PP = IP/IP+1. Por lo
D16S539 11 13 11 12
tanto, la PP se acercará a 100%, en la medida que
TH01 7 8 6 9 el IP combinado sea más alto.
TPOX 8 8 8 8
CSF1PO 11 11 10 12
¿Es necesario que se estudie a la madre?
D2S1338 21 25 19 25
D19S433 14 14 13 14 Aunque se podría asumir que en un estudio de
En negrita: marcadores y los alelos que permiten excluir la paternidad no es necesario incluir a la madre, la
paternidad. posibilidad de identificar con certeza el alelo here-

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Tabla 3. Perfiles genéticos, IP combinado y PP de un caso en que se asigna paternidad

y se incluye a la madre

Marcador Alelos de la madre Alelos del hijo/a Alelos del p-Padre IP

D3S1358 15 15 15 16 15 16 2,43
vWA 16 17 17 18 15 18 3,27
FGA 23 25 23 23 21 23 3,12
D8S1179 11 13 11 15 13 15 4,26
D21S11 29 31 29 31 29 30 2,10
D18S51 17 18 17 18 13 17 2,22
D5S818 11 13 12 13 11 12 2,13
D13S317 8 11 8 12 12 12 4,55
D7S820 10 11 11 12 12 12 5,92
D16S539 11 14 11 14 11 13 1,57
TH01 9 9,3 6 9,3 6 7 1,62
TPOX 8 8 8 8 8 11 1,06
CSF1PO 11 12 11 12 12 12 3,07
D2S1338 19 19 19 20 20 22 3,14
D19S433 13 15,2 15 15,2 15 15 5,50
IP combinado 4.018.051
Probabilidad de Paternidad 99,9999%

dado de la madre permite definir el alelo paterno que se pueda excluir paternidad; por lo tanto, se
obligado y alcanzar IP más altos y probabilidades encontrarán menos STR que permitan excluir
de paternidad también más altas y, por lo tanto, la paternidad que en un caso en que se estudie
más seguras. Cuando no se estudia a la madre, se también a la madre. En el ejemplo de la Tabla 2, el
deben utilizar fórmulas que, comparadas con la número de STR que excluye paternidad aumenta
que se aplica para casos con la madre, disminuyen de 6 a 9 marcadores, si se incluye a la madre en el
el IP combinado y la PP8. En el ejemplo de la Tabla estudio. Esto adquiere especial relevancia, si hay
3, el estudio incluye a la madre, con lo que se ob- parentesco entre dos presuntos padres.
tiene un IP combinado de 4.018.051 y una PP de
99,9999%. En cambio, si en el mismo caso la madre
no se estudia, el IP disminuye a 939 (4.000 veces Calidad, aspectos éticos y legales
menor) y la probabilidad de paternidad a 99,89%.
De acuerdo a la normativa emitida por el Servicio La fuerza legal de la prueba de ADN para el
Médico Legal el año 2000, la paternidad biológica estudio de paternidad está ampliamente aceptada
se considera acreditada cuando la probabilidad de en Chile, lo que se refleja en las modificaciones
paternidad es mayor al 99,9%7. introducidas ya en el año 2000 a nuestra ley de
En casos de exclusión de paternidad, el incluir filiación9.
a la madre también hace más seguro el estudio de En nuestro país es posible acceder a realizarse
paternidad, porque permite tomar en cuenta sólo el estudio de paternidad en forma privada o por
el alelo paterno obligado para definir si hay exclu- solicitud de un juez. Para los estudios realizados en
sión de paternidad. En cambio, si sólo se estudian forma privada existen aun algunas interrogantes,
supuestos padre e hijo/a, los dos alelos del hijo/a por ejemplo, respecto a que en algunos laborato-
deberán estar ausentes en el supuesto padre para rios sea posible que un hombre, aún no siendo el

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Conceptos básicos sobre estudio de paternidad - M. Lagos et al

padre legal de un niño/a menor de edad, pueda incluyen (tríos). Si en cualquier caso existen dudas
acceder a un estudio de paternidad sin el conoci- sobre la probabilidad de paternidad, es posible
miento y consentimiento de la madre o tutor legal. estudiar marcadores genéticos adicionales.
Los estudios solicitados a través de un tribunal
se realizan en el Servicio Médico Legal y también
en laboratorios privados, si los involucrados asu- Referencias
men los costos del examen. Sin embargo, para que
estos resultados tengan validez legal, los laborato- 1. Albrecht K, Schultheiss D. Proof of paternity: historical
rios deben estar habilitados por el Servicio Médico reflections on an andrological-forensic challenge. An-
Legal de Chile y cumplir con las exigencias de la drologia 2004; 36: 31-7.
normativa emitida por este Servicio7. 2. Butler JM. Forensic DNA Typing: Biology, Technology, and
Dada la implicancia que tiene un estudio de Genetics of STR Markers, (2005) 2nd edition. NewYork:
paternidad en la vida de un ser humano, es im- Elsevier.
portante que los laboratorios donde se realicen 3. Jorquera GH, Acuña PM, Cifuentes LL. Estudios de pa-
estudios de paternidad, tengan éstos validez legal rentesco mediante marcadores del ADN: Experiencia en
o no, estén inmersos en un sistema de asegura- resolución de casos en los últimos años. Rev Med Chile
miento de la calidad, incluyendo aspectos como 2008; 136: 193-200.
confidencialidad, cadena de custodia, control de 4. Kristt D, Stein J, Yaniv I, Klein T. Assessing quantitative
calidad, entre otros. chimerism longitudinally: technical considerations, cli-
nical applications and routine feasibility. Bone Marrow
Transplant 2007; 39: 255-68.
Cierre del caso 5. STR data base. Disponible en http://www.cstl.nist.gov/
strbase (Consultado el 22 marzo de 2011).
En el caso presentado, la probabilidad de pa- 6. Butler JM. Short tandem repeat typing technologies
ternidad es de 99,89%, lo que corresponde a una used in human identity testing. Biotechniques 2007; 43:
paternidad biológica altamente probable, pero Sii-Sv.
no alcanza el mínimo aceptado para paternidad 7. Instrucciones y normativa técnica sobre pruebas bioló-
biológica acreditada (> 99,9%), de acuerdo a la gicas para la determinación de la paternidad y/o mater-
normativa vigente en Chile y a lo aceptado por los nidad. Diario Oficial/Normas Generales/Año 2000/DO
tribunales de familia de nuestro país. Al no estu- 08/01/2000 RES 1.450 2000. Servicio Médico Legal.
diar a la madre, estando ella disponible, se le restó 8. Wenk RE, Houtz T, Chiafari FA. Maternal typing and
fuerza estadística al estudio, por lo que se debería test sufficiency in parentage analyses. Transfusion 2006;
recomendar que se le incluyera para así alcanzar 46:199-203.
una probabilidad > 99,9%. Otro antecedente a 9. Ley de Filiación 19.585 Diario Oficial de 26 de octubre
considerar es que los estudios de paternidad sin la 1998. Resolución Exenta Nº 1.450 de 29 diciembre 1999,
madre (dúos) tienen un costo similar a los que la Diario Oficial 8 enero 2000.

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